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熒光定量 PCR 中無(wú) Ct 值或 Ct值過(guò)晚,該如何解決？

在熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)里，無(wú)Ct值出現(xiàn)和Ct值過(guò)晚是常讓科研人員頭疼的問(wèn)題。這些問(wèn)題會(huì)嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性，接下來(lái)我們就深入探討下背后的原因和解決辦法。一、無(wú)Ct值出現(xiàn)的原因及解決辦法（一）循環(huán)數(shù)設(shè)置不合理正常情況下，PCR循環(huán)數(shù)一般不宜超過(guò)45循環(huán)。要是循環(huán)數(shù)設(shè)置不夠，可能因擴(kuò)增產(chǎn)物量不夠，熒光信號(hào)沒達(dá)到可檢測(cè)水平，導(dǎo)致無(wú)Ct值。比如在一些低拷貝數(shù)模板的檢測(cè)中，若循環(huán)數(shù)只設(shè)30次，很可能就檢測(cè)不到產(chǎn)物。解決辦法：依據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)和模板預(yù)估量，合理增加循環(huán)數(shù)，不過(guò)要注意...

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梯度 PCR 儀怎么選？基因工程實(shí)驗(yàn)高效工具科普

朋友們，在基因工程相關(guān)實(shí)驗(yàn)里，PCR儀可是常用又關(guān)鍵的設(shè)備，像梯度PCR儀、熒光定量PCR儀，不同類型功能大不同，今天就結(jié)合基因工程知識(shí)，聊聊這類儀器，還會(huì)講講朗基PCR儀的實(shí)用特點(diǎn)～先復(fù)習(xí)下基因工程基礎(chǔ)概念！生物技術(shù)里，基因工程、蛋白質(zhì)工程這些是重要分支；遺傳工程廣義包含染色體工程、基因工程等，狹義就是基因工程，而重組DNA技術(shù)是基因工程核心，克隆則是無(wú)性繁殖產(chǎn)生后代或相同遺傳性狀群體?；蚬こ踢^(guò)程分上游和下游技術(shù)，上游是基因重組、克隆和表達(dá)設(shè)計(jì)構(gòu)建，下游涉及工程菌大規(guī)模培...

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分子動(dòng)力分析為什么離不開分析互作儀

一、動(dòng)力學(xué)分析的核心需求:捕捉動(dòng)態(tài)相互作用動(dòng)力學(xué)分析的本質(zhì)是研究分子、細(xì)胞或系統(tǒng)在時(shí)間維度上的行為變化，例如藥物與靶標(biāo)蛋白的結(jié)合速率、蛋白質(zhì)折疊路徑、病毒與宿主受體的識(shí)別過(guò)程等。這類研究需要實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)分子間相互作用的動(dòng)態(tài)參數(shù)，如結(jié)合常數(shù)（Kd）、解離速率（koff）、結(jié)合速率（kon）等，而這些參數(shù)直接決定了生物過(guò)程的效率與機(jī)制。傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)方法（如熒光標(biāo)記、放射性同位素法）存在標(biāo)記干擾、耗時(shí)長(zhǎng)、通量低等缺陷，難以滿足復(fù)雜動(dòng)態(tài)系統(tǒng)的分析需求。而分子互作儀通過(guò)無(wú)標(biāo)記、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的技術(shù)特...

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以下是臺(tái)式生物反應(yīng)器加工、制造工藝的詳細(xì)解析

以下是對(duì)臺(tái)式生物反應(yīng)器加工、制造工藝的詳細(xì)解析：一、材料準(zhǔn)備1.材料選擇容器材質(zhì)：根據(jù)生物反應(yīng)的要求，臺(tái)式生物反應(yīng)器的容器部分通常采用不銹鋼（如316L）或高性能塑料（如聚碳酸酯、聚丙烯）。不銹鋼具有良好的耐腐蝕性、機(jī)械強(qiáng)度和良好的熱傳導(dǎo)性能，適用于大多數(shù)生物反應(yīng)環(huán)境，尤其是需要高溫滅菌或涉及腐蝕性介質(zhì)的反應(yīng)。高性能塑料則具有成本低、重量輕、化學(xué)穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，適合一些對(duì)溫度和壓力要求不特別高的生物反應(yīng)。密封材料：密封材料的選擇至關(guān)重要，因?yàn)樗苯佑绊懛磻?yīng)器的密封性能和生物安...

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限制性內(nèi)切酶是怎么被命名的？

大家好！歡迎來(lái)到今天的科學(xué)小課堂。在分子生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)室里，有一種能精準(zhǔn)切割DNA的"基因手術(shù)刀"，叫限制性內(nèi)切酶。但HindⅢ、EcoRI這些復(fù)雜名字總讓人摸不著頭腦，它們的命名其實(shí)藏著一套科學(xué)又有趣的規(guī)則，今天咱們就來(lái)拆解這些"分子剪刀"的身份密碼。故事要從20世紀(jì)70年代說(shuō)起。1973年，美國(guó)科學(xué)家H.D.Smith和D.Nathans在研究流感嗜血桿菌時(shí)，提出了酶命名的基本框架，就像給酶發(fā)放了第一張卡片。隨著基因工程發(fā)展，1980年R.J.Roberts完善了這套規(guī)則，...

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