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層析工藝放大需要遵循的原則

層析工藝放大原則包括線性放大原則和固定保留時間原則。線性放大原則線性放大原則是工藝放大過程中常用的原則，其核心思路是保持層析柱柱高和線性流速不變，只放大層析柱直徑和體積流速。固定的柱高和線性流速理論上可以保證相同的保留時間、層析中溶液用到的CV數(shù)和洗脫樣品CV數(shù)，較大程度保證相同的純化效果。線性放大原則的具體操作方法可參見下表：層析工藝在實際的應用過程中，線性放大可能會遇到幾個問題，一是層析設備供應商提供的層析柱都是幾個固定規(guī)格，可能無法適配具體某項的工藝需求；二是當層析柱直...

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熒光定量PCR實驗中PCR儀器選購技巧

聚合酶鏈反應(PCR)技術是無數(shù)研究和測試實驗室的主要技術，涉及的領域包括生物醫(yī)學、基因編輯、食品微生物學測試等。熒光定量PCR技術使用熱循環(huán)來促進一系列反應，在這些反應中，DNA樣本會快速、呈指數(shù)地復制，從而產生數(shù)百萬或數(shù)十億個序列拷貝。購買PCR儀器時，重要的是要考慮您的應用的最終目標、熱循環(huán)設備的準確性和效率以及儀器的容量和靈活性。本文概述了PCR儀器可用的不同選項和功能，以幫助您選購合適的PCR儀。1.PCR與qPCR與dPCR雖然所有PCR系統(tǒng)都使用聚合酶鏈式反應復...

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應用差速離心法分離外泌體的原理

外泌體是一種小的(40-100nm)細胞外膜囊泡，目前進行外泌體分離的普遍方法是差速離心法。應用差速離心法和粒徑分析等是細胞外囊泡(EV)研究的重要步驟。已知細胞會分泌許多膜囊泡，這些囊泡的大小、分子含量及其形成機制各不相同具體取決于細胞的類型和當前狀態(tài)。通常可以辨別出三個主要的EV群體：凋亡小體、脫落的囊泡和外泌體.凋亡小體是已知較大的囊泡，直徑為800-5000nm，由凋亡后細胞的細胞質和質膜成分組成。脫落的囊泡和外泌體由非凋亡細胞釋放。脫落的囊泡，也稱為“胞外體”或有時...

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影響細胞培養(yǎng)的環(huán)境因素有哪些

細胞培養(yǎng)環(huán)境主要通過CO2培養(yǎng)箱、震蕩培養(yǎng)箱（即溫度、濕度、O2和CO2張力）和基礎細胞培養(yǎng)基及其補充劑來實現(xiàn)。這不僅包括碳水化合物、維生素、氨基酸、礦物質、生長因子、激素等營養(yǎng)素的供應，還包括控制培養(yǎng)物pH值和細胞滲透壓等理化特性的成分。此外，固體或半固體生長基質和細胞密度分別允許細胞-基質錨定和細胞-細胞相互作用，這進一步控制了生理相關微環(huán)境的模擬。為滿足特定細胞類型的要求，市場上已有多種細胞培養(yǎng)基組合物，并且可以根據(jù)它們補充血清的水平進行分類。胎牛血清(FBS)形式的血...

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外泌體制造需要哪些實驗室設備

外泌體是蛋白質、脂質和核酸的天然載體，在細胞間通訊中起著至關重要的作用。外泌體包含各種膜蛋白，例如內體相關蛋白（Alix、Tsg101和Rab蛋白）、四跨膜蛋白（CD63、CD81、CD82、CD53和CD37）和脂筏相關蛋白（糖基磷脂酰肌醇和flotillin）。隨著近年來生物技術、實驗室設備的不斷發(fā)展，外泌體有著廣泛的應用前景，包括藥物發(fā)現(xiàn)、配體篩選和靶向藥物遞送。進而即用型、高質量的功能性外泌體的需求也越來越顯明，這種工業(yè)外泌體生產需要通過大規(guī)模外泌體制備和純化來實現(xiàn)。...

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